液相色谱的操作流程详解
发布时间:2021-06-23
1. 打开泵和检测器的开关。
2. 先打开电脑,再打开打印机。
3. 显示器上会出现“Hewlett Packard System Hardware Test”字样,表示电脑正在检查系统;硬盘。如果计算机没有发现任何问题,显示器将显示“通过”字样。
4. 接下来,输入“C:\> win”进入HPLC系统。
5. 显示器上将出现“HP Chemistation”字样,然后双击“Instrument online HPLC system”。
6. 显示器将显示“HPLC system”字样,它为您提供“峰”(进样时)、流动相或溶剂的流速、波长和压力。
7. 对于泵,点击“pump on”按钮,然后点击“enter”。
8. 对于检测器,单击“灯亮”按钮,然后单击“进入”。之后,根据需要调整波长的大小。
9. 通过在计算机“仪器”和“设置泵”图标处键入数值来调整泵的状态。
9.1 流动相流速从 0.1 ml/min 开始调整
9.2 选择合适的溶剂作为流动相;举些例子
A. 乙腈
B. 水
C:醋酸
D. 甲醇
流动相可以混合在一起,例如B 10%,D 90%
10. 以 0.1 ml/min 的步长逐渐增加流动相的流速。随着时间的推移,压力越来越大。当显示器上出现“Ready”字样时,压力就恒定了。然后将流动相的流速再增加一级。重复相同的方式,直到达到首选流量。等到基线稳定,然后准备注入样品。
11. 在将样品注入 HPLC 之前,用样品清洁注射器。然后将样品注入并加载到 HPLC 中,检测器将检测样品的成分并计算时间。
12. 每个组分的峰将在不同的保留时间显示在监视器上。当没有检测到更多峰时,按 F8 按钮停止检测样品。
13. 计算机将计算并积分每个峰的面积。然后将结果以面积和保留时间之间的关系表示。单击以下图标可以查看峰和其他结果;“查看”、“数据分析”、“负载信号”和“积分结果”。
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