尽管高效液相色谱(HPLC)柱的相对成本随着时间的推移而降低，但延长柱的寿命仍然是大多数实验室的重要考虑因素。以下提示将有助于保护您的色谱柱，并显著延长大多数固定相的使用寿命。

　　色谱柱操作手册推荐了压力、洗脱液酸碱度和温度的操作规范。

　　较高的操作温度通常与较低的酸碱度操作范围密切相关。在低酸碱度下，柱降解的主要症状通常是柱沙巴滚球官网入口损失(峰展宽)，而在高酸碱度下，峰拖尾和柱背压增加。

　　避免柱床的机械冲击(落下柱)，每次启动洗脱液时缓慢增加压力和流速(1毫升/分钟/分钟)。

　　大多数沙巴滚球官网入口高效液相色谱设备可以通过二次仪表设置自动实现这种流量-压力斜坡。压力冲击引起的床空隙通常表现为分裂或非常严重的拖尾峰。如果替代品不容易获得，色谱柱可以反转进行分析。然而，色谱柱的沙巴滚球官网入口可能会下降得更快，因为床最终会以相反的方向坍塌，导致相同的色谱症状。

　　如果色谱柱干燥，用至少含50%乙腈的洗脱液非常缓慢地启动流速(0.1毫升/分钟/分钟)。

　　如果怀疑“标准”(非“水溶液”或非极性插层相类型)反相柱会因使用100%含水流动相而坍塌(缩短保留时间和沙巴滚球官网入口低下)，则应在高流速下重新激活柱60C的100%乙腈(注意不要从柱中剩余的洗脱液中沉淀出任何固体缓冲液)。在这两种情况下，可能需要50到100个列卷才能正确地重新平衡或重新激活阶段。


　　每次使用后正确清洁色谱柱
　　建议的清洁程序可能是：

　　目前含量为90%乙腈，每2柱体积为10%有机物，保留10柱体积(再次提醒，注意缓慢增加乙腈浓度，避免固体缓冲液沉淀，此处推荐)。

　　向50:50乙腈-水中加入10%乙腈，共2个柱体积，保留10个柱体积。
　　从系统上取下端盖并保存。色谱柱的端盖对于避免相干燥非常重要。
　　人们可能会使用较旧的高效液相色谱系统作为色谱柱“清洗站”，这可以节省“实时”仪器上的大量操作时间。

　　如果样品中可能含有颗粒物，请选择合适网目尺寸的高质量在线过滤器；传统色谱柱的典型值为0.45米，UHPLC色谱柱的典型值为0.2米。

　　如果样品基质或稀释剂可能损坏吸附剂(例如，由于pH值)或化学性质特别脏或难以处理，可以使用保护柱，并且相应的值与分析柱的值相匹配。选择保护柱的尺寸并将其连接到分析柱时应小心，以确保分离沙巴滚球官网入口不受影响。如果怀疑色谱柱或筛板因劈峰或沙巴滚球官网入口损失而被污染，可以反转色谱柱方向进行反洗，上述的色谱柱清洗程序就是一个很好的“配方”。

　　色谱柱应从检测器中取出，以避免结垢，需要注意的是，反冲洗只能作为最后手段，可能无法达到色谱柱的原有沙巴滚球官网入口。

　　请记住，可以使用  r2  L   0.6(用于高效液相色谱柱填充材料的硅胶的近似间隙孔隙率)来估计柱体积。

　　因此，对于150  4.6 mm的色谱柱，大约为：
　　3.142 (2.3) 2 150 0.6=1496升或1.5毫升。