高效液相色谱是一种以液体为流动相,利用高压输注系统将不同极性的单一溶剂或混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。柱内成分分离后,进入检测器进行检测,从而实现样品的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商品检验和法律检验等领域的重要分离分析技术。
作为实验室最常见的精密仪器之一,它们使用频繁,容易出现各种故障。为此,边肖整理了HPLC使用中常见的日常维护方法,希望能为用户日常使用提供一些参考。
一、.流动相和样品制备要求。
1、高效液相色谱法酒精、双蒸水、缓冲盐必须过滤,流动相需要定期更换。
2.流动相脱气非常重要(可采用抽滤、超声波脱气等方法)
3.样品溶解后,用0.22微米有机膜或水膜过滤。
二、高压恒流泵的维护和保养。
1.高压恒流泵为整个色谱系统提供稳定平衡的流动相流量,从而保证系统的稳定运行和重现性。高压输液泵由步进电机和柱塞等组成。长时间的高压运行会逐渐磨损泵的内部结构。当增加流速时,梯度应该增加,优选每次0.2毫升/分钟,然后在压力稳定后增加,以此类推,直到达到所需的流速。
2.特殊情况下,可将过滤头取下取出,判断是否堵塞;流动相也可以用注射器吸出,用过滤器吸头吸出,判断是否堵塞。堵塞时,用异丙醇或甲醇进行超声波清洗;如果清洗不成功,需要更换。
3.仪表用完后,及时清洗管道,冲洗泵,保证泵的良好运行环境和正常使用寿命。
三、色谱柱的维护。
1.所用的流动是
高效液相色谱级或同等级别。制备过程中,所有非高效液相色谱试剂或溶液用0.22um滤膜过滤,流动相仅在使用前用超声波脱气。使用。
2.用过的水必须通过蒸馏净化,然后用0.22um的水膜过滤。现在使用所有测试解决方案。并且样品必须在用0.22um膜注射器注射后过滤。
3.使用的最大流量为1.0 mL/min,因此增加流量的过程应为梯度增加,流量不会突然下降。
4.仪器检测后,柱需要用流动相梯度洗脱1小时以上。
四、工作站维护。
如果出现崩溃,您可以重新启动计算机。当它不能正常工作时,你可以先更换电脑来测试它的硬件故障。或者重新插上这台机器的接口,重新安装软件。