一台性能良好的液相色谱仪就像一个健康的人,如下所述:
泵——心脏;
流动相——血液
取样器——口腔
色谱柱 — 消化系统
探测器——眼睛
工作站——大脑
样品 — 食物
像心脏一样,泵持续地将液相泵送到系统的其他部分。采样器像我们的嘴一样将样品加入系统,流动相将样品带入色谱柱,就像食物进入消化系统,在胃肠道被消化吸收一样。探测器就像我们的眼睛,我们吃的东西会在大脑中做出相应的反应。
保持健康需要体育锻炼,液相色谱也需要保养。
1.泵维护
高压输液泵是液相色谱仪的核心。泵密封圈是最容易磨损的零件。密封圈损坏可能导致泄漏或压力波动;止回阀的正常运行非常重要。如果失败,将直接影响交通的稳定。正常情况下的高压泵是液相色谱准确分析的基础。高压输液泵由电机、凸轮组、柱塞杆和泵头组成。
长时间高压运行会逐渐磨损泵头内部结构,特别是使用盐或未过滤色谱时。泵的性能和用途很大程度上与流动相有关。流动相在放入机器前必须过滤和脱气。
使用前,所有溶剂必须过滤0.45m(或0.22m),以去除杂质颗粒。使用膜过滤时,应特别注意区分有机相(脂溶性)膜和水相(水溶性)膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,但过滤水溶液时流速较低或滤膜不移动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁使用有机溶剂,否则会溶解滤膜。混合流动相可以在混合前单独过滤。如果混合后需要过滤,选择合适的滤膜。选择时参考滤膜化学相容性表。
2.流动相脱气
常见的脱气方法有抽真空、超声波、吹氦气等。超声波脱气具有操作简单、成本低的优点。超声处理10-20分钟就足以对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合物进行脱气(一般500 ml溶液需要超声处理20-30分钟)。该方法不影响溶剂组成。超声波作用时注意避免溶剂瓶与超声波罐底部或罐壁接触,以免玻璃瓶破碎。容器中的液位不应高于水位太多。离线脱气方法不能保持溶剂的脱气状态。停止脱气后,气体立即开始返回溶剂。在1-4小时内,溶剂将被环境气体饱和。
一般有机溶剂中的气体容易去除,而水溶液中的气体比较顽固。吹溶液中的氦气是一种非常有效的脱气方法。这种连续脱气方法常用于电化学检测。但是氦气价格昂贵,难以普及。
3.小心使用卤化有机溶剂。
卤化溶剂可能含有微量酸性杂质,并会在高效液相色谱系统中与不锈钢发生反应。卤化溶剂和水的混合物更容易分解,不应长期储存。卤化溶剂(如CCl 4、CHCl 3等。)与各种醚(如乙醚、二异丙醚、四氢呋喃等)混合。)可能会反应生成一些对不锈钢有高度腐蚀性的产品,所以尽量不要使用混流或新鲜制备。此外,当卤化溶剂(如CH 2 Cl 2)与一些反应性有机溶剂(如乙腈)混合并静置时,会发生结晶。简而言之,卤化溶剂最好新鲜制备。如果与干燥的饱和烷烃混合,也不会出现类似的问题。