1.加入有机物后测量流动相

　　校准酸度计，以给出水溶液沙巴滚球官网入口确的酸碱度读数，即您确认其为水性的缓冲液。如果你在加入有机物的情况下测量pH值，pH值会和加入有机物之前测量的不同。

　　然而，最重要的是保持一致。如果你总是在加入有机物后测量酸碱度，请确保方法中有说明，这样每个人都可以用同样的方法来做。不会100%准确，但至少会保持一致。这可能比准确的pH值更重要。
         

　　2.不要使用缓冲

　　有缓冲溶液控制pH值，抵抗pH值的变化。该方法的许多其他部分(如样品基质、空气中的CO2、流动相的水源)会改变流动相的酸碱度，导致保留率、峰形和峰响应的变化。
甲酸、TFA等。不是缓冲区。


　　3.缓冲液没有在正确的酸碱度范围内使用。

　　每种缓冲盐都有2个酸碱度单位的宽范围，其中它提供了最佳的酸碱度稳定性。在这个窗口之外，盐对于抵抗pH值的变化是无效的。

　　要么在正确的范围内使用缓冲液，要么选择范围覆盖所需pH值的缓冲液。


　　4.将缓冲液添加

　　将含水缓冲液混合到有机相中缓冲液沉淀的风险很高——在许多情况下，沉淀非常细，可能不明显。有机物质总是被添加到水相中，这大大降低了缓冲液沉淀的风险。


　　5.用泵混合0%的梯度。

　　沙巴滚球官网入口泵在混合流动相和在线脱气方面非常有效，但并不是每个最终使用你的方法的人都有高质量的泵。将甲和乙的起始混合物预混合成单一溶液，并在甲线上100%运行。例如，通过将950毫升水溶液与50毫升有机溶液混合，然后过滤和脱气来制备起始混合物。这降低了高效液相色谱之间的可变性以及系统中气泡和沉淀的风险。但是，请注意，在泵上混合的95:5不会提供与在瓶中预混合的9533605相同的保留时间。——预混合时，通常需要添加更多百分比的有机物。


　　6.对应的缓冲液。

　　使用正确的酸碱度来调节酸或碱。只使用形成你正在使用的缓冲盐的酸或碱。例如，磷酸钠缓冲液只能用磷酸或氢氧化钠调节。


　　7.方法中没有说明你的缓冲液的所有信息，比如称5g磷酸钠到1000ml水中。

　　缓冲液的类型(一元、二元或三元)决定了缓冲液的酸碱度范围。所需的摩尔浓度决定了缓冲液的强度。或者5g无水磷酸钠和5g一水磷酸钠将具有不同的缓冲强度，并将影响保留。


　　8.用有机物填充管道，无需检查之前的内容。

　　如果之前的方法在B线使用了缓冲液，而你的方法在B线使用了有机物，那么你很可能会在泵管/泵头中沉淀缓冲液。我在早期就这样做了，造成了很多伤害。如有疑问-将其冲洗干净(80:20水：有机)。


　　9.最后一次支撑瓶子滴出

　　现在是5比5，你几乎没有足够的流动相来运行——。最后几个样本就会化为乌有。除了运行泵和干燥色谱柱的风险之外，流动相会从表面蒸发，因此瓶顶部的流动相会改变整体组成。如果你用瓶子里最后的渣滓，从顶部开始的部分就是流过柱子的部分。


　　10.用超声波对流动相脱气。

　　这对于确保所有缓冲盐溶解非常有用，但这是最不有效的脱气方法，会快速加热流动相，导致有机物质部分蒸发。我们稍后会解决这个问题-花5分钟真空过滤您的流动相-脱气和过滤在一个步骤。