通过研究色谱图所描绘的内容,我们可以简单地理解色谱图的定义。色谱图是一个二维图形,纵轴给出了检测器在以下几个方面的浓度响应,横坐标代表时间。检测器给出峰值响应,其高度应理想地取决于特定成分的浓度。
保留时间
保留时间(tr)
但由于分析条件的限制,峰可能偏离理想形状,峰高不再是真实的浓度度量,而是将峰下面积视为组分浓度的度量。
每个峰代表样品中存在的一种成分。保留时间是注射和最大峰值之间的时间间隔。它是运行条件下部件特性的特征。在相同的操作条件下,可以通过注入参考材料来确认成分的身份。对照品保留时间与组分峰的匹配证实了未知样品组分的同一性。
现在让我们考虑一个包含多个样本组件的样本。同样,根据溶质-固定相的相互作用和流动相的流动特性,每种组分的洗脱保留时间也不同。
结果计算
成绩统计
根据使用简单算法的面积测量,可以容易地计算每种成分在总量中的浓度百分比。
% A=[乳胶]\frac{A峰面积X 100}{总峰面积(A B C D)}[/乳胶]
真实色谱图
现在让我们看看食品基质中维生素A和维生素E混合物的高效液相色谱分离的实际色谱打印输出,看看色谱图代表什么
色析法的
实际色谱图
纵坐标以伏特为单位,横坐标以分钟为单位。紫外检测器用于记录波长为284纳米的信号。
在色谱图上方和下方的表格数据中,每个峰的保留时间用保留时间、面积(以数字单位表示)、峰面积%、高度和高度%标记。你可以观察到,由于峰形的形状不理想,每个成分的百分比面积和百分比高度是不同的,所以面积测量是一种更可靠的浓度测量。