我们在实验检测过程中色谱柱难免都会发现异常,有时无法找到异常情况出现的原因,这时候我们就该有所察觉分析出现的异常。当分析出现异常的情况就可以更换色谱柱了。
高背压:
背压的增加通常是HPLC色谱柱入口玻璃料堵塞的结果。要在大多数情况下消除堵塞,您可以降低流速使溶剂流过色谱柱,并使100%的强溶剂流过色谱柱以消除堵塞。如果您的压力无法恢复正常,则玻璃料将被不可逆地阻塞,或者色谱柱中有空隙。两种情况都需要更换色谱柱。
分裂峰:
色谱柱入口处的玻璃料堵塞也可导致许多分裂峰,从而导致进样进样。要解决此问题,请首先遵循上面概述的步骤。如果分离峰仍然存在,则可能是由于您的方法运行条件不正确(工作太接近化合物的pKa或使用强注入溶剂)或色谱柱被严重保留的污染物污染。如果进样口不可逆转地堵塞或固定相上沾满了污染物,则需要更换色谱柱。
HPLC色谱柱是易耗品,因此随着时间的流逝,您将开始失去关键色谱对的分离度。可能会进行某些色谱柱再生,并且每个色谱柱都有其自己的特定操作规程,但是,一旦达到关键化合物对的分离度损失并且无法再生,您的色谱柱就已经达到了特定色谱柱的自然寿命您正在做的分析。
宽峰形状:
除了色谱柱寿命的自然终点外,还会出现一些峰展宽的原因,这些原因包括:进样超载,缓冲不足,方法条件不当以及强进样溶剂。但是,如果这些元素已被消除,则峰展宽是您色谱柱老化的一个标志。一旦您的峰形恶化到无法再通过系统适用性或解决关键对的时候,就该分开了。
色谱仪器显示峰保留时间偏移经常是由于方法控制差而导致的,但是,在相污染的情况下,如果您的相出现结垢,您将看到峰的保留时间偏移。并非所有的峰都会受到同等的影响,如果您排除了故障排除中的所有方法问题,则可能的原因是固定相污染,因此您的色谱柱将需要更换。