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色谱技术是在反相条件下进行的，但其他色谱技术是在自然分离条件下进行的，需要高离子强度、100%水洗脱液。对于高效液相色谱系统，这些条件可能是有问题的：没有杀菌剂，缺乏适当的维护可导致细菌污染数小时内。高盐浓度的存在增加了流动相中颗粒的可能性。液相色谱系统中细菌和微粒的存在将影响色谱的质量和色谱柱的寿命，色谱系统的组成部分同样重要。如果色谱系统不是惰性的或生物相容性的，则可能发生金属-蛋白质加合物或不期望的蛋白质-蛋白质相互作用。如果色谱系统的润湿路径中含有钢组分，长期使用离子强度高的100%流动相也会导致生锈。然而，通过正确设置和维护色谱系统，可以在最短的停机时间内实现稳定和可重复的色谱。
尺寸排除和/或离子交换色谱系统的维护和使用需要许多与任何其他系统相同的标准实践。然而，高盐溶液流动相需要一些附加协议。尽管本文件中概述的实践适用于acquity UPLC系统，但这些原则适用于任何色谱系统。整体系统建议包括：如果使用钢系统，请根据制造商的建议进行修改。对于与waters UPLC系统一起使用，我们提供了详细的指南。
1.正确清洁实验室玻璃器皿
2.如果观察到慢性填料损失、止回阀问题、保留时间再现性、压力或定量再现性，请根据标准方案清洁系统。3
3.如有可能，使用含有抗菌剂（即0.02%叠氮化钠）的流动相防止微生物生长
4.保留时间或压力波动可能表明泵有问题
5.峰面积或峰变化无保留时间变化可能表明注入器有问题
6.其他建议按成分列出。这些因素包括微生物生长、系统适用性和/或蛋白质稳定性
溶剂输送系统：
SEC和IEX中使用的缓冲液有利于微生物生长，导致柱和系统污染（图1）。建议包括：
1.始终通过兼容的0.22μ 水基流动相采用M以下的膜过滤器过滤。也建议使用无菌过滤器和容器
2.仅使用高纯度水（18.2 m）Ω 瓶装水应在使用当天打开，不要“加满”流动相瓶。更换流动相时务必更换瓶子
3.高离子强度洗脱液（>；100 mm）应每两周更换一次低离子强度洗脱液（<；100 mm）应每2-3天更换一次
4.水（100%）瓶应每天更换
5.更高的盐浓度可抑制微生物生长，减少溶剂更换的频率。虽然改变流动相并不总是可行的，但四元溶剂混合体系可以通过与高浓度缓冲液相结合来实现（>；100 mm）产生sec和IEX流动相，以达到相同的效果。
6.应每天目视检查所有洗脱液瓶是否有微生物生长和/或颗粒。微生物生长可以是瓶子表面的一层薄膜，也可以通过旋转瓶子来观察；如果洗脱液瓶子中出现微生物生长，则更换流动相过滤器或用70%异丙醇溶液冲洗。微生物会污染流动相过滤器
7.使用兼容的流动相过滤器，如钛。每周清洁流动相过滤器以减少微生物污染。超声波处理或用70%异丙醇溶液清洗
8.建议的密封清洗周期为0.10分钟（6秒）
9.建议用90/10水/甲醇清洗密封
10.溶剂管理器不应在高盐流动相或100%水中闲置
11.短期储存，保持0.1 ml/min，从所有使用的管线中提取相同百分比的流动相
12.如果系统闲置超过2天，请在每条管线中注入高纯度水10分钟。彻底冲洗系统。用90/10水/甲醇重复上述步骤。
1.正确清洁实验室玻璃器皿
2.如果观察到慢性填料损失、止回阀问题、保留时间再现性、压力或定量再现性，请根据标准方案清洁系统。3
3.如有可能，使用含有抗菌剂（即0.02%叠氮化钠）的流动相防止微生物生长
4.保留时间或压力波动可能表明泵有问题
5.峰面积或峰变化无保留时间变化可能表明注入器有问题
6.其他建议按成分列出。这些因素包括微生物生长、系统适用性和/或蛋白质稳定性
溶剂输送系统：
SEC和IEX中使用的缓冲液有利于微生物生长，导致柱和系统污染（图1）。建议包括：
1.始终通过兼容的0.22μ 水基流动相采用M以下的膜过滤器过滤。也建议使用无菌过滤器和容器
2.仅使用高纯度水（18.2 m）Ω 瓶装水应在使用当天打开，不要“加满”流动相瓶。更换流动相时务必更换瓶子
3.高离子强度洗脱液（>；100 mm）应每两周更换一次低离子强度洗脱液（<；100 mm）应每2-3天更换一次
4.水（100%）瓶应每天更换
5.更高的盐浓度可抑制微生物生长，减少溶剂更换的频率。虽然改变流动相并不总是可行的，但四元溶剂混合体系可以通过与高浓度缓冲液相结合来实现（>；100 mm）产生sec和IEX流动相，以达到相同的效果。
6.应每天目视检查所有洗脱液瓶是否有微生物生长和/或颗粒。微生物生长可以是瓶子表面的一层薄膜，也可以通过旋转瓶子来观察；如果洗脱液瓶子中出现微生物生长，则更换流动相过滤器或用70%异丙醇溶液冲洗。微生物会污染流动相过滤器
7.使用兼容的流动相过滤器，如钛。每周清洁流动相过滤器以减少微生物污染。超声波处理或用70%异丙醇溶液清洗
8.建议的密封清洗周期为0.10分钟（6秒）
9.建议用90/10水/甲醇清洗密封
10.溶剂管理器不应在高盐流动相或100%水中闲置
11.短期储存，保持0.1 ml/min，从所有使用的管线中提取相同百分比的流动相
12.如果系统闲置超过2天，请在每条管线中注入高纯度水10分钟。彻底冲洗系统。用90/10水/甲醇重复上述步骤。
SEC和IEX条件通常需要样品管理器清洗线中的高离子强度溶液（清洗/吹扫、强针和弱针）。然而，这些洗脱液可能对样品注射器和/或针头产生不利影响。对于通过针系统的可变流量，定期清除盐沉积，以尽量减少维护和维修。其他建议包括：
1.确保样品可溶于流动相，样品管理器清洗
2.遵循制造商关于清洗溶剂的建议。例如，acquity UPLC H-class生物系统推荐的洗涤剂含盐量小于500 mm
3.如果出现可见的盐沉积，请清洁表面。如果再次出现积盐，请检查连接和系统是否有问题。4
4.如果样品管理器闲置超过2天，用高纯水清洁针头和/或管道（至少20个周期或200秒）。用90/10水/甲醇重复上述步骤燃气轮机；样品管理器在100 mm）管道中的闲置时间不得超过2天
紫外线检测器：
在水性条件下执行sec或IEX时，waters建议使用钛或不锈钢光流池。标准acquity光流池的流道中含有聚四氟乙烯AF。在自然条件下，一些蛋白质可能与流动细胞表面发生相互作用，导致峰值拖尾和基线倾斜。对检测器的建议包括：使用钛或不锈钢流动细胞来减少蛋白质与表面的相互作用。其他流动池材料（即特氟隆）可能会导致峰拖尾
不要让检测器在高盐洗脱液中闲置。用水彻底冲洗（以0.2 ml/min的流速冲洗60分钟），然后使用90/10水/甲醇或更高的有机洗脱液。
1.确保样品可溶于流动相，样品管理器清洗
2.遵循制造商关于清洗溶剂的建议。例如，acquity UPLC H-class生物系统推荐的洗涤剂含盐量小于500 mm
3.如果出现可见的盐沉积，请清洁表面。如果再次出现积盐，请检查连接和系统是否有问题。4
4.如果样品管理器闲置超过2天，用高纯水清洁针头和/或管道（至少20个周期或200秒）。用90/10水/甲醇重复上述步骤燃气轮机；样品管理器在100 mm）管道中的闲置时间不得超过2天
紫外线检测器：
在水性条件下执行sec或IEX时，waters建议使用钛或不锈钢光流池。标准acquity光流池的流道中含有聚四氟乙烯AF。在自然条件下，一些蛋白质可能与流动细胞表面发生相互作用，导致峰值拖尾和基线倾斜。对检测器的建议包括：使用钛或不锈钢流动细胞来减少蛋白质与表面的相互作用。其他流动池材料（即特氟隆）可能会导致峰拖尾
不要让检测器在高盐洗脱液中闲置。用水彻底冲洗（以0.2 ml/min的流速冲洗60分钟），然后使用90/10水/甲醇或更高的有机洗脱液。
为保持较长的色谱柱寿命并将微生物污染的风险降至最低，应遵循以下建议：
- 色谱柱不得存放在高盐、水性流动相或 100% 水中。
- 在切换到推荐的存储条件之前，用 10-20 柱体积的水冲洗柱。
- 按照制造商的建议冲洗和储存色谱柱。典型的建议是使用 10-20% 的甲醇或使用杀菌剂（即 0.1% 的叠氮化钠）。
- 考虑使用保护柱来延长柱寿命。可能需要定期更换。保护柱更换频率可能取决于样品清洁度。
- 尺寸排阻柱通常可以储存在 4-8 °C 以减少微生物生长。离子交换柱通常在室温下储存。有关详细信息，请查看制造商的建议。
