在文献中,离子色谱和高效液相色谱之间的界限有时是模糊的。其实这两种方法是息息相关的。下面总结了高效液相色谱和离子色谱的区别。
分离机制
在高效液相色谱中,分离是基于分析物和固定相之间的疏水相互作用(反相高效液相色谱)或亲水相互作用(正相高效液相色谱)。
这意味着该方法适用于极性和非极性有机化合物的分离。反相高效液相色谱是最广泛使用的高效液相色谱模式类型。分离依赖于有机溶剂作为洗脱剂。在集成电路中,最关键的分离机制是离子交换。
根据应用,可以使用其他机制,例如离子配对和离子排斥。离子交换分离依赖于固定相中离子分析物和离子交换基团之间的化学反应,而不是高效液相色谱中的物理相互作用。
然而,当使用正确的流动相和色谱柱时,也可以使用集成电路设备分离非离子和极性化合物。这使得集成电路适用于分离有机和无机离子以及极性物质。
洗脱液
高效液相色谱分离是用有机溶剂作为洗脱剂进行的,通常采用梯度洗脱来获得弱保留分析物的良好分辨率,使强保留分析物的洗脱速度更快。样品通常也溶解在有机溶剂中,与洗脱液混溶。
与高效液相色谱不同,离子色谱中的分离发生在水相中。洗脱液通常由含有溶解盐或酸的超纯水组成。大多数离子色谱分离可以使用等度洗脱进行,即不需要梯度。
分离柱
高效液相色谱和离子色谱中的分离柱是基于表面修饰的颗粒作为固定相,它们与分析物相互作用进行分离。但表面功能化不同:HPLC中的固定相依赖于疏水(反相HPLC)或极性(正相HPLC)官能团,而ic则以阴离子或阳离子交换基团为特征。
集成电路柱不仅在内部与高效液相色谱柱不同:集成电路柱的外壳由化学惰性的聚醚醚酮制成,而不是不锈钢,不锈钢在暴露于集成电路中使用的洗脱液时容易腐蚀。
图1。IC柱和HPLC柱的区别不仅仅在内部:IC柱的外壳是由化学惰性的PEEK代替不锈钢制成的,当暴露在IC中使用的洗脱液中时容易被腐蚀。
检测
紫外检测器是高效液相色谱的主要检测器。紫外检测器可以检测吸光物质,因为离开分离柱的洗脱液会受到紫外光的照射。根据不含样品的流动相和含分析物的洗脱液之间的吸光度差异计算分析物。电导检测器通常用于集成电路。通过测量洗脱液电导率的变化,可以检测并定量分析物。电导率检测是一种灵敏但非选择性的检测方法。