HPLC 分析的新兴趋势是什么?
发布时间:2021-07-08
HPLC发展以来,一直站在坚如磐石的基础上,并见证了多项创新,满足了色谱工作者日益增长的期望。
科学家的一些理想特征和期望是:
以最低的柱背压实现高分离沙巴滚球官网入口
减少溶剂消耗和高速分析
低水平的检测和定量
在宽温度范围内分离
几乎完整的 pH 值范围可用于分析
填充柱的机械强度更高
色谱柱使用寿命更长
柱子的大样品装载能力
通过多项创新,已经有可能实现理想的功能,这些创新对 HPLC 技术在全球实验室中的普及做出了显着贡献。
固定相的进展
固定相特性是通过高效液相色谱有效分离混合物组分的主要决定因素。迄今为止,硅胶色谱柱主要用于大多数分离。然而,最近开发的包装材料开辟了新的应用领域。
超压液相色谱 (UPLC)
柱效随着粒径的减小而增加。亚 2μm 粒径于 2003 年推出,为快速分离铺平了道路。减少色谱柱长度和直径以提供更快的分离和更高的灵敏度成为可能。小尺寸颗粒会造成柱背压升高的问题,这可以通过仪器的进步以允许在高压下操作来克服。
纳米孔和微孔高效液相色谱
对有限数量的样品进行分析一直是一个挑战。纳米孔高效液相色谱提供解决方案,以实现飞摩尔级的高质量分辨率,以实现可靠的识别和定量。纳米柱的内径小至 75 μm,流速高达 300 nL/分钟,用于纳米孔应用。
微孔 HPLC 柱的内径约为 1 mm,流速为 50-75 µL/分钟。纳米孔色谱柱和微孔色谱柱均已充分发挥其质谱检测系统的潜力,特别是在生物基质中的肽分析中。
联用液相色谱技术
已经开发了多种联用技术,例如 LC-MS、LC-FTIR、LC-AAS,但 LC-MS 已广泛应用于一系列复杂分子的分离和定量,特别是在生物分析分离中。
快速蛋白质液相色谱
该模式主要应用于蛋白质的纯化。它具有从毫克级到公斤级分离的潜力。分离和隔离基于树脂和蛋白质之间的电荷分离。洗脱基于缓冲液组成的变化。
亲和层析
亲和色谱在分离生物化学分子(如核酸)和生物体液(如血液)中的蛋白质纯化方面具有潜力。它基于抗原-抗体、酶和底物或受体以及配体之间的相互作用。
手性色谱
立体活性柱填料的发展主要是多糖衍生物,如纤维素、淀粉酶和环糊精,已用于广泛的旋光分子。在早期,使用传统的分离模式无法分离此类分子。
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