高效液相色谱是一种实验室分析混合物的技术。它是一种高效的色谱法，它使用高压而不是简单的重力来推动混合物样品通过色谱柱。样品被注入，然后一个包含高压力的泵帮助样品沿着填充柱移动，在那里它被分离成单独的组分。然后通过检测器分析该分离以产生结果。


注射部位
为了注入 HPLC，样品必须首先溶解在极性液体溶剂中，最好是具有已知 HPLC 光谱的溶剂，以便可以将其数据与样品的数据区分开来。将含有样品的液体溶液放入仪器并送入色谱柱。注射部位的实际位置取决于器械的品牌。在大多数情况下，注射过程是自动化的，但在某些情况下，实验室工作人员必须使用小注射器针头注射样品。


泵组件
HPLC 单元的泵组件是必需的，因为它提供推动样品通过色谱柱的压力。泵的强度各不相同，但强大的泵可以产生高达 6,000 psi 或每平方英寸磅的压力，这是在注入样品后施加的。与仅使用重力滴入相比，这允许样品更快速、更有效地通过色谱柱。


列描述
样品通过泵通过色谱柱的速度增加允许使用与简单液相色谱中使用的色谱柱不同类型的色谱柱。色谱柱中的填料可以具有更小的粒径，这会增加表面积，从而有助于样品与色谱柱的相互作用。大多数 HPLC 色谱柱通过极性工作。样品溶解在极性溶剂中，色谱柱主要由非极性烃组成。样品分子的极性部分通过色谱柱非常快，因为它们主要与溶剂相互作用，而样品的非极性组分在色谱柱中逗留，与色谱柱组分形成弱相互作用。因此，样品的组分从色谱柱上从最极性到最非极性的顺序离开。

检测功能
检测器也因所使用的 HPLC 仪器类型而异。但是，大多数功能都以相同的基本方式运行。当分离出的样品成分离开色谱柱时，紫外线光源照射在它们上。大多数有机化合物吸收一定量的光，因此当它们通过施加的光束时，检测器可以检测吸收了多少光。检测器还根据组分离开色谱柱的顺序记录组分的保留时间。然后可以根据峰面积分析该输出，以确定样品组分的确切性质。