高效液相色谱柱常见故障及排除
发布时间:2021-07-26
高效液相色谱柱的硬件包括柱管和连接器,其中包含用于分离的色谱填料。硬件不仅需要足够坚固以承受分离过程中的背压,还需要得到良好的控制、无泄漏、最小体积和零死体积。它为入口的样品和出口的分析物带提供了流动路径。
高效液相色谱的硬件需要对分离系统呈化学惰性,包括样品、流动相和固定相。不锈钢制成的立柱具有最高的耐压特性。如果需要完成特殊的化学或生物应用,需要惰性表面,耐低压的工程塑料和玻璃柱将是更好的选择。
色谱分辨率显示两种化合物的分离程度。高效液相色谱柱的机械和化学分离能力是决定分离效果的关键因素。机械分离能力取决于高效液相色谱柱的长度、粒径和填充床均匀性。化学分离能力是由色谱柱中填料和流动相之间化合物的物理和化学竞争引起的。
高质量高效液相色谱柱
高效液相色谱柱的操作条件
最好保持恒温恒湿。温度在15-30摄氏度之间,相对湿度小于80%,房间应通风良好,空调或其他设备产生的气流不应直接在仪器下方。此外,最好避免直射光线,远离电气干扰大、振动大的设备。
高效液相色谱柱常见故障及排除
一个常见的故障是高效液相色谱柱压高。在这种情况下,可以采用以下方法:
1.拆下保护柱看看柱压是否还高,否则就是保护柱的问题。如果塔压仍然很高,重新检查;
2.从仪器上取下色谱柱。如果压力仍然没有下降,说明管道堵塞,需要清洗。如果压力下降,色谱柱的入口和出口依次与仪器连接,体积是色谱柱的10倍。清洗色谱柱。如果塔压仍然没有下降,重新检查;
3.更换色谱柱入口处的筛板。如果柱压下降,则表明溶剂样品含有固体颗粒。如果柱压仍然很高,可以将其连接在注射器和保护柱的在线过滤器之间。
另一个问题是基线不稳定、波动或漂移。在这种情况下,可以采用以下方法:
1.流动相有溶解气体,超声脱气15-30分钟;
2.单向阀堵塞可以解除超声波插头;
3.系统有泄漏,确定泄漏位置并修复;
4.色谱柱平衡缓慢,特别是当流动相改变时,可以用中等强度的溶剂洗涤。当改变流动相时,在分析前用流速为10-20倍的相对柱洗涤。
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