色谱工作者总是期待为每次分析获得完美形状的峰，但实际上峰会由于多种原因而失真。失真令人沮丧，但如果采取适当的校正步骤，则可以避免峰形失真。


理想峰


平顶峰


当检测器因样品过载时会出现平顶峰响应。在这种情况下，检测器的灵敏度要高得多，并且会饱和以产生宽阔的平顶峰。一种选择是衰减信号响应（不是实际的解决方案），因为其他峰的检测也会受到影响。更可行的选择是降低样品浓度或进样量。


峰拖尾


峰拖尾是由于表面硅烷醇基团电离为 - Si-O - 提供阳离子交换位点而引起的常见失真。解决方案在于使用高纯度级硅胶载体以及推荐的 pH 值范围 2-8。


缓冲液控制添加剂的使用也限制了硅胶表面上硅烷醇基团的电离。添加剂如三氟乙酸 (TFA) 是一种离子配对剂，有助于抑制电离。浓度范围为 10-25 mM 的缓冲液添加剂足以满足大多数应用的需求。


通过过滤流动相溶剂、使用入口过滤器和更换泵密封件，在它们开始磨损和释放垃圾颗粒之前，可以防止筛板堵塞或空隙形成。


低纯度二氧化硅通常含有促进硅烷醇基团电离的金属杂质。由于与固定相中的金属离子螯合，使用高纯度硅胶固定相有助于拖尾。


峰前


与峰拖尾相比，峰前移不太常见


通常由于色谱柱内的沟道而导致峰前移。最好更换色谱柱或以其他方式在推荐的 pH 范围内操作。


色谱柱过载也会导致峰前移。使用稀释样品或减少进样量。


流动相与样品的不相容性通常会导致峰前移。将样品溶解在流动相或其他兼容溶剂中


峰肩和分裂峰


肩峰和分裂峰通常是由于两种未分离的化合物的存在造成的。


减少样品量或使用稀释溶液通常可以解决分裂问题


峰的分裂也是由玻璃料堵塞引起的。使用 20 – 30 ml 流动相的反向流动通常可以解决峰分裂问题。


更换堵塞的筛板或保护柱


当由于存在两种接近洗脱的化合物而导致分裂时，请在进样前进行样品净化


正如您在上面看到的那样，导致峰形失真的许多原因很常见，例如流动相的 pH 控制、颗粒污染造成的堵塞、筛板堵塞和色谱柱过载。如有必要，可以通过采取纠正步骤和其他推荐步骤来改善扭曲的形状。