高效液相色谱 (HPLC) 是分析化学中的一种技术,用于分离混合物中的成分,并识别和量化每种成分。我们在实验过程中总是出现很多问题,但是又不知道怎么解决,如果你了解其中的原理就很容易排除故障原因,以下为大家详尽解说高效液相色谱仪每个部件的原理。
泵HPLC的发展导致了泵系统的发展。
泵位于液相色谱系统的最上游,并产生从溶剂容器到系统的洗脱液流。
高压产生是泵的“标准”要求,除此之外,它还应能够在任何条件下提供稳定的压力以及可控制和可再现的流量。
当前LC系统中使用的大多数泵都是通过电动机驱动的活塞(往复泵)来回运动来产生流量的。由于这种活塞运动,它会产生“脉冲”。
注射器喷油器放置在泵旁边。
最简单的方法是使用注射器,然后将样品引入洗脱液流中。
最广泛使用的进样方法是基于采样环。
自动进样器(自动进样器)系统的使用也得到了广泛使用,它允许按设定的定时进行重复进样。
柱子分离在塔内进行。
最近的色谱柱通常在不锈钢外壳中而不是玻璃色谱柱中制备。
与碳酸钙相比,通常使用的填充材料是二氧化硅或聚合物凝胶。
用于LC的洗脱液从酸性到碱性溶剂不等。
大多数色谱柱外壳均由不锈钢制成,因为不锈钢可耐受多种溶剂。
探测器分析物的分离在色谱柱内部进行,而检测器用于观察获得的分离。
当不存在分析物时,洗脱液的组成是一致的。而分析物的存在会改变洗脱液的组成。检测器的作用是测量这些差异。
该差异作为电子信号的形式被监视。有不同类型的检测器可用。
录音机检测器检测到的洗脱液变化是电子信号的形式,因此我们的眼睛仍然看不见。
在较早的时期,笔(纸)图表记录器被广泛使用。如今,基于计算机的数据处理器(集成商)更为普遍。
有各种类型的数据处理器。包括内置打印机和文字处理器的简单系统,以及专门为LC系统设计的软件,不仅具有数据采集功能,而且还具有峰拟合,基线校正,自动浓度计算,分子量测定等功能。 。
脱气机用于LC分析的洗脱液可能包含我们的眼睛不可见的气体,例如氧气。
当洗脱液中存在气体时,会将其检测为噪音并导致基线不稳定。
脱气机使用特殊的聚合物膜管去除气体。
聚合物管表面上的许多非常小的孔允许空气通过,同时防止任何液体通过该孔。
柱加热器
LC分离通常受色谱柱温度的很大影响。
为了获得可重复的结果,保持一致的温度条件很重要。
同样对于某些分析(例如糖和有机酸),在升高的温度(50至80°C)下可以获得更好的分离度。
因此,通常将色谱柱保存在色谱柱箱(柱加热器)内。